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一、选择性实验
聽1.产品介绍
聽葡萄球菌选择性琼脂110主要用于金黄色葡萄球菌的分离及培养。
聽2.实验原理
聽胰酪蛋白胨、酵母浸粉提供微生物生长所需的碳氮源、维生素和氨基酸；D-甘露醇为可发酵的糖类；乳糖为金黄色葡萄球菌可利用的糖类；氯化钠用以维持反应体系的渗透压；磷酸氢二钾是缓冲剂；琼脂作用是培养基凝固剂。
聽3.培养基配方
|
成分 |
用量（g/L） |
|
胰酪蛋白胨 |
10.0 |
|
酵母浸粉 |
2.5 |
|
明胶 |
30.0 |
|
D-甘露醇 |
10.0 |
|
乳糖 |
2.0 |
|
氯化钠 |
75.0 |
|
磷酸氢二钾 |
5.0 |
|
琼脂 |
15.0 |
|
pH7.2±0.2 |
25℃ |
聽4.实验方法
聽①称取本品149.5g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,备用；
聽②样品液按国家标准、SN标准、ISO标准或其它方法制备而成；
聽③取适量样品液涂布接种于已凝固好的葡萄球菌选择性琼脂110培养基平板上；
聽④将接好菌的平板倒置放入培养箱，于36±1℃培养18-24h，观察菌株生长情况。
聽5.结果判断
聽接种以下质控菌株，平板倒置放入36±1℃培养箱中，培养18-24h。
|
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
生长情况 |
其它特征 |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
10-100 |
+++ |
生长良好，有明显菌落 |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
10-100 |
+++ |
生长良好，有明显菌落 |
|
表皮葡萄球菌 |
CMCC 26069 |
10-100 |
+++ |
生长良好，有明显菌落 |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
- |
生长抑制 |
聽葡萄球菌选择性琼脂110微生物生长结果如图一。
a：金黄色葡萄球菌25923；b：金黄色葡萄球菌6538；c：表皮葡萄球菌26069；d：大肠埃希氏菌25922
图一
二、验证实验
聽1.甘露醇发酵产酸实验
聽配制0.04%的溴麝香草酚蓝指示剂滴加于菌落,如变为黄色,即为阳性。
聽1.1实验原理及现象
聽 金黄色葡萄球菌可利用甘露醇产酸，溴麝香草酚蓝指示剂为pH指示剂（变色范围为pH值6.0～7.6），在酸性条件下显黄色，即溴麝香草酚蓝指示剂使金黄色葡萄球菌显示阳性实验结果如图二。
聽2.明胶液化实验
聽将硫酸铵饱和水溶液滴加于菌落,10分钟后,如围绕菌落出现一清晰带,即为阳性。
聽2.1实验原理及现象
聽金黄色葡萄球菌能产生明胶酶，使明胶分解为氨基酸，从而失去凝固力，即显示阳性实验结果如图二。
a：金黄色葡萄球菌25923；b：金黄色葡萄球菌6538
图二
三、注意事项
聽1.本产品仅可用于科研实验。
聽2.使用此培养基后续应辅助其他相关实验验证实验结果。
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聽注：本文属海博论坛论坛生物原创，未经允许不得转载。
聽
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