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一、试验原理：
聽
聽本培养基用于滤膜法测定生活饮用水及其水源水中的总大肠菌群。
聽蛋白胨为微生物的生长提供氮源和维生素；乳糖为可发酵的糖类；琼脂是培养基的凝固剂；磷酸氢二钾为缓冲剂；亚硫酸钠和品红对革兰氏阳性菌有弱抑制作用，加入20mL无水乙醇可以提高培养基的抑菌性。亚硫酸钠可以使碱性品红还原脱色，大肠杆菌可以发酵乳糖产生乙醛和酸，乙醛与亚硫酸钠和品红化合物结合形成紫红色菌落，快速发酵乳糖的细菌使碱性品红结晶析出，菌落产生绿色金属光泽。
聽
二、培养基配方（g/L）：
聽
|
蛋白胨 |
10.0 |
|
磷酸氢二钾 |
2.5 |
|
乳糖 |
10.0 |
|
无水亚硫酸钠 |
3.3 |
|
碱性品红 |
0.3 |
|
琼脂 |
12.5 |
|
pH 7.4±0.2聽聽聽聽聽聽聽25℃ |
|
聽
三、试验方法：
聽
聽1、称取本品39.0g，加入20 mL无水乙醇和980 mL蒸馏水中，加热搅拌溶解，121℃高压灭菌15 min，冷却后倾入无菌空平皿中，备用。
聽2、制备质控菌液，接种到培养基平板上。
聽3、放置36±1℃需氧培养24±2小时。
聽
四、结果观察与解释
聽
聽接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养24±2小时。
|
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
参比或计数培养基 |
方法 |
质控结果 |
其它特征 |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
紫红色菌落，有金属光泽 |
|
粪肠球菌 |
ATCC29212 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
|
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC14028 |
/ |
/ |
定性 |
/ |
橙红色菌落 |
|
弗氏柠檬酸杆菌 |
ATCC43864 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
紫红色菌落，稍有金属光泽 |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC8739 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
紫红色菌落，有金属光泽 |
远藤氏琼脂培养基微生物质控结果
a:大肠埃希氏菌ATCC25922聽b:粪肠球菌ATCC29212聽c:鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028
d:弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864聽e:大肠埃希氏菌ATCC8739
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聽注：本文属海博论坛论坛生物原创，未经允许不得转载。
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