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      半固体培养基的使用方法及质控结果

      聽许英俊
      录入时间:2020-10-30 10:41:17 来源:青岛海博论坛论坛生物

      一、培养基用途


      聽用于动力观察,菌种保存,H抗原位相变异试验等。聽聽


      二、培养基基础成分(g/L)


      蛋白胨

      10.0

      牛肉浸粉

      3.0

      琼脂

      4.0

      氯化钠

      5.0

      pH值7.4±0.1

      25℃


      三、试验原理


      聽蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、矿物质;氯化钠维持均衡的渗透压;较少量的琼脂作为培养基的凝固剂。


      四、培养基用法


      聽称取本品22.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,煮沸溶解,分装小试管,121℃高压灭菌15分钟,直立凝固,备用。

      聽此溶液相当于多价鞭毛抗原(H)鉴定中,0.3%~0.4%半固体琼脂的小玻管中的溶液。

      聽如需配置0.55%~0.65%半固体琼脂平板,需在每1000ml溶液中添加1.5~2.5g琼脂即可。


      五、质控


      聽(1)制备好的培养基,穿刺接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养24-48小时。质控标准如下:


      质控菌株

      菌株编号

      接种量(CFU)

      参比或计数培养基

      方法

      质控结果

      其他特征

      大肠埃希氏菌

      ATCC25922

      >5000

      /

      定性

      阳性,扩散生长

      /

      蜡样芽胞杆菌

      CMCC(B)63303

      >5000

      //

      定性

      阳性,扩散生长

      //

      福氏志贺氏菌

      ATCC12022

      >5000

      /

      定性

      阴性,沿穿刺线生长


      宋内氏志贺氏菌

      ATCC25931

      >5000

      /

      定性

      阴性,沿穿刺线生长

      /


      聽(2)质控菌株在该培养基中培养试验结果如下图:质控阳性菌除了在穿刺接种的穿刺线上生长外,在穿刺线的两侧均可见羽毛状或云雾状浑浊生长;质控阴性菌只沿穿刺线呈明显的线状生长。




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      聽注:本文属海博论坛论坛生物原创,未经允许不得转载。

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