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      V-J琼脂培养基的原理和使用方法

      林娇娇
      录入时间:2021-7-23 14:43:28 来源:青岛海博论坛论坛生物

      一、试验原理


      聽本培养基用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养。


      聽明胶蛋白胨、酵母浸粉为微生物的生长提供氮源、碳源及维生素;甘露醇为可发酵糖类;酚红为酸碱指示剂;磷酸氢二钾为pH缓冲剂;甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作用;较高浓度的亚碲酸钾可抑制多数杂菌的生长,金黄色葡萄球菌可还原亚碲酸钾,使菌落显黑色,同时可分解培养基中的甘露醇产酸,使培养基变黄;琼脂是培养基的凝固剂。


      二、培养基配方(g/L)


      明胶蛋白胨聽

      10.0

      酵母浸粉

      5.0

      甘露醇

      10.0

      酚红

      0.025

      磷酸氢二钾

      5.0

      氯化锂

      5.0

      甘氨酸

      10.0

      琼脂

      16.0

      pH7.2±0.2 25℃


      三、试验方法


      聽1、称取本品61.0g,加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中,煮沸1分钟,121℃高压灭菌15min,冷至45-50℃左右时,加入20mL过滤除菌的1%亚碲酸钾溶液,混匀,倾入无菌平皿。


      聽2、制备质控菌液,接种到培养基上。


      聽3、放置于30-35℃恒温培养箱中需氧培养24-48小时。


      四、结果观察与解释


      聽接种以下质控菌株,放置于30-35℃恒温培养箱中需氧培养24-48小时。

      质控菌株

      菌株编号

      接种量

      回收率

      生长情况

      其它特征

      金黄色葡萄球菌

      ATCC 25923

      10-100

      ≥70%

      +++

      黑色菌落,菌落周围黄色

      金黄色葡萄球菌

      ATCC 6538

      10-100

      ≥70%

      +++

      黑色菌落,菌落周围黄色

      表皮葡萄球菌

      CMCC(B)26069

      10-100

      ≥70%

      +++

      黑色菌落,菌落周围不变色

      大肠埃希氏菌

      ATCC 25922

      100-1000

      /

      抑制


      聽V-J琼脂培养基微生物质控结果:






      金黄色葡萄球菌ATCC 25923

      黑色菌落,菌落周围黄色




      金黄色葡萄球菌ATCC 6538

      黑色菌落,菌落周围黄色











      表皮葡萄球菌CMCC(B)26069

      黑色菌落,菌落周围不变色




      大肠埃希氏菌ATCC 25922

      抑制


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      聽注:本文属海博论坛论坛生物原创,未经允许不得转载。

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