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      假单胞CFC选择性培养基的原理和使用方法

      刘浩然
      录入时间:2023-6-28 15:16:32 来源:青岛海博论坛论坛生物

      一、用途及试验原理

      聽 本培养基用于假单胞菌选择性分离培养。

      聽 明胶蛋白胨、酸水解酪蛋白提供氮源、维生素和生长因子;硫酸钾和氯化镁可促进铜绿色素的产生;琼脂为凝固剂;甘油可增强假单胞菌产生色素与荧光;CFC选择性培养基添加剂可抑制除假单胞菌以外的杂菌生长。


      二、培养基配方(g/L)

      明胶蛋白胨

      16.0

      酸水解酪蛋白

      10.0

      硫酸钾

      10.0

      氯化镁

      1.4

      琼脂

      12.0

      pH 7.1±0.2(25℃)


      三、试验方法

      聽 1、称取本品49.4g,另取10g甘油加热溶解于1000mL蒸馏水中,分装每瓶200mL,121℃高压灭菌15分钟,冷却至50℃左右时,每瓶加入一支假单胞菌CFC选择性培养基添加剂(HB8689ad),混匀,备用。

      聽 2、制备菌种悬液,涂布接种至假单胞CFC选择性培养基中。

      聽 3、放置于36℃±1℃恒温培养箱中,需氧培养18h-24h。


      四、质控结果

      聽 接种以下质控菌株,放置36℃±1℃恒温培养箱中,需氧培养18h-24h。菌株培养结果见图1。

      质控菌株

      菌株编号

      接种量(CFU)

      回收率

      生长情况

      其他特征

      铜绿假单胞菌

      ATCC 9027

      10-100

      ≥70%

      +++

      有绿色色素,产荧光

      铜绿假单胞菌

      ATCC 27853

      10-100

      ≥70%

      +++

      有绿色色素,产荧光

      大肠埃希氏菌

      ATCC 25922

      100-1000

      /

      -

      抑制

      金黄色葡萄球菌

      ATCC 25923

      100-1000

      /

      -

      抑制


      图1假单胞CFC选择性培养基的微生物质控结果

      图1假单胞CFC选择性培养基的微生物质控结果


      五、注意事项

      聽 1、培养基中含少量氯化镁,灭菌后可能出现微量沉淀。

      聽 2、本培养基需额外添加甘油,由于甘油粘稠不易吸取,很容易造成添加量偏差。可采取裁剪移液器吸头尖使其口径扩大的方式进行吸取,操作注意平稳缓慢。

      聽 3、假单胞菌CFC选择性培养基添加剂为冻干固体,加1 mL无菌蒸馏水复溶后使用。

      聽 4、与CN琼脂的区别:

      聽 ① 从成份上:主要成分两者相同,不同的是他们选择的抑菌剂不同;

      聽 ② 假单胞CFC选择性培养基是用来推荐分离假单胞菌属。CN琼脂是推荐分离铜绿假单胞菌(又称绿脓假单胞菌或绿脓杆菌)。


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      注:本文属海博论坛论坛生物原创,未经允许不得转载。


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