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      醋酸纤维膜电泳试剂



      录入时间:2024-11-18 16:32:40 来源:现代微生物培养基和试剂手册

      【原理】

      聽 醋酸纤维膜是由醋酸纤维素制成的均一薄膜,对分子移动无阻力,是免疫球蛋白鉴定的一种简单快速的电泳方法。血清蛋白在一定的pH下都带有电荷,由于各种蛋白质的等电点及分子量的不同,所带的电荷也就各不相同,在直流电场的作用下,它们在醋酸纤维膜上泳动的速度也不一样,经过一段时间泳动后,即可彼此分开,形成电泳图谱。


      (一)巴比妥缓冲液(pH8.6,离子强度(μ)0.05)

      【成分】

      5.5二乙基巴比妥钠
      10.3g
      5.5二乙基巴比妥酸
      1.84g
      蒸馏水
      1000ml

      【制法】

      聽 将以上两种成分加入蒸馏水中,加热溶解即可,


      【用途】

      聽 蛋白电泳用。

      (二)染色液

      1.0.05%氨基黑染液

      【成分】

      氨基黑10B
      0.5g
      1mol 醋酸
      500ml
      0.1mol 酸酷钠
      500ml

      【制法】

      聽 先将醋酸和醋酸钠溶液混匀后,再加入氨基黑粉剂,待充分混匀溶解后,即可使用。


      2.0.25%氨基黑染液

      【成分】

      氨基黑10B
      1.0g
      甲醇
      200ml
      冰醋酸
      40ml
      蒸馏水
      160ml

      【制法】

      聽 先将后3种成分混匀,然后再加入氨基黑混匀溶解后,即可使用。


      【用途】

      聽 用于经电泳后之醋酸纤维膜标本的染色。

      (三)5%醋酸脱色液

      【成分】

      甲醇
      90ml
      醋酸
      10ml
      蒸馏水
      100ml

      【制法】

      聽 把以上3种成分混合摇匀后,即可使用。


      【用途】

      聽 用于经染色后之醋酸纤维膜电泳标本的脱色。

      (四)透明液

      【成分】

      95%乙醇
      7
      冰醋酸
      3

      【制法】

      聽 将以上两种成分混匀后,即可使用。


      【用途】

      聽 用于“染过色的醋酸纤维膜电泳标本”的透明。

      (五)蛋白洗脱液

      【成分】

      1N 氢氧化钠
      500ml
      0.1N EDTA
      50ml
      蒸馏水
      500ml

      【制法】

      聽 将以上3种成分混匀后即可使用。


      【用途】

      聽 用于洗脱醋酸纤维膜的蛋白带。

      聽 注:此液用于洗脱氨基黑染色的蛋白带,而丽春红RS染的蛋白带则用0.4NNaOH 溶液。

      (第二军医大学蔡燕刚、吴挹芳编 吴挹芳审)

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