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    改良胰蛋白胨大豆液体培养基(mTSB)的原理和使用方法

    段亚可
    录入时间:2024-12-20 10:25:13 来源:青岛海博论坛论坛生物

    一、试验用途及原理

    聽 改良胰蛋白胨大豆液体培养基(mTSB)用于产志贺毒素大肠埃希氏菌样品的制备和增菌。

    聽 胰酪蛋白胨、大豆蛋白胨在培养基中作为营养物质提供菌体生长所需要的氮源、维生素、生长因子等;氯化钠维持体系渗透压平衡;三号胆盐为抑制剂,抑制革兰氏阳性菌的生长;磷酸氢二钾为菌体生长提供相对稳定的酸碱缓冲体系;葡萄糖提供菌体生长所需要的碳源。


    二、培养基配方(g/L)

    胰酪蛋白胨

    17.0

    大豆蛋白胨

    3.0

    氯化钠

    5.0

    三号胆盐

    1.5

    磷酸氢二钾

    4.0

    葡萄糖

    2.5

    pH值7.4±0.2(25℃)


    三、试验方法

    聽 1、称取本品33.0g,加热溶解于1000mL纯化水中,分装,121℃高压灭菌15min,备用。

    聽 2、制备质控菌株,做10倍系列梯度稀释,选择适宜稀释度的菌悬液,接种至培养基中,并做空白对照。

    聽 3、放置于41.5℃±0.5℃恒温培养箱中,需氧培养18h-24h。


    四、质控结果

    聽 接种以下质控菌株,放置于41.5℃±0.5℃的恒温培养箱中,需氧培养18h-24h。试验结果如图1所示。

    质控菌株

    菌株编号

    接种量(CFU)

    生长情况

    其它特征

    大肠杆菌O157

    ATCC 35150

    10-100

    +++

    浑浊

    大肠埃希氏菌

    ATCC 25922

    10-100

    +++

    浑浊

    金黄色葡萄球菌

    ATCC 25923

    100-1000

    -

    抑制


    图1改良胰蛋白胨大豆液体培养基(mTSB)的质控菌株培养结果


    五、试验注意事项

    聽 1、使用非一次性试管等容器进行试验时,应对容器进行无菌处理,以免增加试验的不确定性或污染。

    聽 2、灭菌结束后,应尽快取出,冷却至室温使用。


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    注:本文属海博论坛论坛生物原创,未经允许不得转载。

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