聽聽聽聽聽聽许多情况下,病毒颗粒与标本中其他颗粒混杂在一起,很难分辨形态。免疫电镜技术是借助抗血清与病毒颗粒特异性结合,包被病毒使之凝聚加以区别。可以观察病毒含量较少的标本是其优点。聽
1、原理聽
聽聽聽标本中的病毒与稀释的血清中抗体结合形成抗原一抗体复合物,电镜观察。聽
2、材料聽
①20g/l磷钨酸(PTA)。用双蒸馏水配制20g/l磷钨酸溶液,用1mol/lNaOH校正pH值为6.8。
②涂有炭及聚乙烯醇缩聽甲醛的铜网。聽
③病毒相应抗血清。聽
④平皿、滤纸、游丝镊子、微量毛细管,10g/l琼脂凝胶块,蜡皈。聽
3、操作方法聽
①取0.9ml病毒悬液,加入0.1ml稀释的病毒相应血清,37℃30min,充分反应。聽
②取10g/l琼脂凝胶块,下面垫三层普通滤纸,将一滴抗原-抗体复合物悬滴在琼脂凝胶块上,将涂膜的铜网扣在悬滴表面使之漂浮。聽
③在悬滴未被吸干之前取下铜网,倒转在蜡板上,立即滴加磷钨酸染液染色1min,用滤纸毛边吸干多余染液,电镜观察。聽
4、结果聽
聽聽聽显示病毒形态、结构。聽
5、注意事项聽
聽聽聽注意掌握抗原、抗体比例,比例适当方可形成大小合适的抗原聽;聽抗体复合物。聽
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