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      聽聽首页 > 微生物知识->微生物检测方法和标准->出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法——4

      出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法——4



      录入时间:2008-12-26 13:15:17 来源:青岛海博论坛论坛生物

      聽聽聽聽聽聽聽聽附录A 聽培养基和试剂聽    (补充件)
      A1 月桂基硫酸盐胰蛋白(月示)(LST)肉汤  
      胰蛋白(月示)或胰酪胨(Trypticase)  20g聽  
      氯化钠               5.0g  
      乳糖                5.0g  
      磷酸氢二钾(K2HPO4)         2.75g聽  
      磷酸二氢钾(KH2PO4)         2.75g  
      月桂基硫酸钠            0.1g  
      蒸馏水               1000.0mL  
      聽聽聽将各成分溶解于蒸馏水中。分装到有倒立发酵管的20mm×150mm试管中,每管10mL。121℃高压灭菌15min。最终pH6.8±0.2。
      A2 煌绿乳糖胆盐(BGAB)肉汤  
      蛋白胨聽            10.0g  
      乳糖             聽10.0g  
      牛胆粉(oxgall或oxbile)溶液  聽200.0mL聽  
      0.1%煌绿水溶液        13.3mL聽  
      蒸馏水聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽1000ml  
      聽聽将蛋白胨乳糖溶于约500mL蒸馏水中,加入牛胆粉溶液200mL(将20.0g脱水牛胆粉溶于200聽mL蒸馏水中,pH7.0~7.5),用蒸馏水稀释到975mL,调pH7.4。再加入0.1%煌绿水溶液13.3mL,用蒸馏水补足到1000mL,用棉花过滤后,分装到20mm×150mm试管(管内有倒立的小发酵管)中,每管10mL。121℃高压灭菌15min。最终pH7.2±0.1。
      A3聽EC肉汤  胰蛋白(月示)或胰酪(月示)聽20.0g  
      3号胆盐或混合胆盐    聽1.5g聽  
      乳糖           5.0g  
      磷酸氢二钾(K2HPO4)    4.0g聽  
      磷酸二氢钾(KH2PO4)    1.5g  
      氯化钠          5.0g聽  
      蒸馏水        聽聽聽聽1000.0mL聽  
      聽聽将以上成分溶解于蒸馏水中,分装16mm×150mm试管(管内有倒立的小发酵管),每管8mL。121℃高压灭菌15min,最终pH6.9±0.1。
      A4 伊红美蓝琼脂(EMB)  
      蛋白胨      聽10.0g聽  
      乳糖聽       10.0g聽  
      磷酸氢二钾(K2HPO4)聽2.0g聽  
      琼脂       聽15.0g  
      伊红γ(水溶性)  聽聽0.4g或2%水溶液20mL聽  
      美蓝       聽0.065g或0.5%水溶液13mL聽  
      蒸馏水      聽1000.0mL  
      聽聽在1000mL蒸馏水中煮沸溶解蛋白胨、磷酸盐和琼脂,加水补足至原量。分装于三角烧瓶中。每瓶100mL或200mL,高压灭菌15min。最终pH7.1±0.2。使用前将琼脂融化,于每100mL琼脂中加5mL灭菌的20%乳糖水溶液、2mL的2%伊红γ水溶液和1.3mL0.5%的美蓝水溶液,摇匀,冷至45~50℃倾注平皿。聽聽聽
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