聽聽聽聽聽聽聽聽附录A 聽培养基和试剂聽 (补充件)
A1 月桂基硫酸盐胰蛋白(月示)(LST)肉汤
胰蛋白(月示)或胰酪胨(Trypticase) 20g聽
氯化钠 5.0g
乳糖 5.0g
磷酸氢二钾(K2HPO4) 2.75g聽
磷酸二氢钾(KH2PO4) 2.75g
月桂基硫酸钠 0.1g
蒸馏水 1000.0mL
聽聽聽将各成分溶解于蒸馏水中。分装到有倒立发酵管的20mm×150mm试管中,每管10mL。121℃高压灭菌15min。最终pH6.8±0.2。
A2 煌绿乳糖胆盐(BGAB)肉汤
蛋白胨聽 10.0g
乳糖 聽10.0g
牛胆粉(oxgall或oxbile)溶液 聽200.0mL聽
0.1%煌绿水溶液 13.3mL聽
蒸馏水聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽1000ml
聽聽将蛋白胨乳糖溶于约500mL蒸馏水中,加入牛胆粉溶液200mL(将20.0g脱水牛胆粉溶于200聽mL蒸馏水中,pH7.0~7.5),用蒸馏水稀释到975mL,调pH7.4。再加入0.1%煌绿水溶液13.3mL,用蒸馏水补足到1000mL,用棉花过滤后,分装到20mm×150mm试管(管内有倒立的小发酵管)中,每管10mL。121℃高压灭菌15min。最终pH7.2±0.1。
A3聽EC肉汤 胰蛋白(月示)或胰酪(月示)聽20.0g
3号胆盐或混合胆盐 聽1.5g聽
乳糖 5.0g
磷酸氢二钾(K2HPO4) 4.0g聽
磷酸二氢钾(KH2PO4) 1.5g
氯化钠 5.0g聽
蒸馏水 聽聽聽聽1000.0mL聽
聽聽将以上成分溶解于蒸馏水中,分装16mm×150mm试管(管内有倒立的小发酵管),每管8mL。121℃高压灭菌15min,最终pH6.9±0.1。
A4 伊红美蓝琼脂(EMB)
蛋白胨 聽10.0g聽
乳糖聽 10.0g聽
磷酸氢二钾(K2HPO4)聽2.0g聽
琼脂 聽15.0g
伊红γ(水溶性) 聽聽0.4g或2%水溶液20mL聽
美蓝 聽0.065g或0.5%水溶液13mL聽
蒸馏水 聽1000.0mL
聽聽在1000mL蒸馏水中煮沸溶解蛋白胨、磷酸盐和琼脂,加水补足至原量。分装于三角烧瓶中。每瓶100mL或200mL,高压灭菌15min。最终pH7.1±0.2。使用前将琼脂融化,于每100mL琼脂中加5mL灭菌的20%乳糖水溶液、2mL的2%伊红γ水溶液和1.3mL0.5%的美蓝水溶液,摇匀,冷至45~50℃倾注平皿。聽聽聽
聽聽聽
聽
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