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    进出口行业标准-出口食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)——7



    录入时间:2008-12-29 13:36:41 来源:青岛海博论坛论坛生物

    6.14聽氰化钾培养基(KCN)
    6.14.1制备聽  
    蛋白胨       10.0g聽  
    氯化钠    聽聽聽聽聽聽5.0g聽  
    磷酸二氢钾   聽 聽0.225g聽
    磷酸氢二钠     5.64g  
    硝酸钾(无亚硝酸盐) 1.0g聽  
    5g/L氰化钾溶液  聽聽10.0mL聽  
    蒸馏水聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽1000.0mL聽  
    将蛋白胨、氯化钠和硝酸钾加入聽900mL蒸馏水中,搅拌均匀,静置约10聽min,加热煮沸至完全溶解,调至pH7.6±0.1,高压灭菌121℃,15min,取出置于4℃冰箱内进行冷却。  
    将磷酸二氢钾、磷酸氢二钠溶于100聽mL蒸馏水,高压灭菌121℃,15min,取出进行冷却。  
    在冷却后的上述培养液900mL中,以无菌操作加入磷酸盐缓冲液100mL和5g/L氰化钾溶液(必须用冷却的灭菌蒸馏水配制)10mL,摇混均匀(氰化钾的最终浓度为0.05聽g/L)。并立即分装灭菌试管(12聽mm×100mm),每管约1~1.5mL,同时加入约0.3mL灭菌石蜡油封盖。在4℃冰箱中可保存7d。    聽
    6.14.2 试验与判断聽
    6.14.2.1制试剂  
    甲液:  
    氨基苯磺酸 聽0.8g聽  
    5聽mol/L乙酸聽100.0mL聽  
    乙液:  
    α-萘胺 聽聽聽聽聽0.5g聽  
    5聽mol/L乙酸聽100.0mL聽
    6.14.2.2试验聽  
    在三糖铁琼脂斜面上挑取少量菌苔,先接种于吲哚培养基中,混匀(使其浓度近似于聽37℃,24h肉汤培养物)然后烧灼接种环,再沾取吲哚培养基少许接种于氰化钾培养基中,聽于37℃培养24±2h。培养之后,先观察培养液有无混浊,然后在每支氰化钾培养物试管内滴加甲液1滴,然后再滴加乙液1滴,摇匀。聽
    6.14.2.3判断  
    强阳性反应为鲜红色,弱阳性为粉红色,在30~60聽min内,强阳性可转为暗褐色。阴性无变化(加试剂前,培养液出现混浊,即有细菌生长,亦为阳性反应)。
    6.15聽丙二酸钠培养基(M)聽  
    酵母膏   聽1.0g聽  
    硫酸铵   聽2.0g聽  
    磷酸氢二钾 聽0.6g聽  
    磷酸二氢钾 聽0.4g聽  
    氯化钠  聽聽聽2.0g聽  
    丙二酸钠  聽3.0g聽  
    葡萄糖   聽0.25g聽  
    溴麝香草酚蓝聽0.025g或5g/L溶液5聽mL聽  
    蒸馏水聽聽聽聽聽聽聽1000.0mL聽  
    除溴麝香草酚蓝外,将其他成分加入蒸馏水中搅拌均匀,静置约10聽min,加热煮沸至完全溶解,调至pH6.9±0.1,加入溴麝香草酚蓝,再混匀,分装试管(12mm×100mm),聽每管1~1.5mL,高压灭菌115℃,10min。  
    试验与判断:
    接种大量幼嫩待试菌,于37℃培养24±2h,阳性反应为普蓝色;阴性不变色。聽
    6.16聽卫矛醇半固体琼脂(D)聽  
    蛋白胨    2.0g聽
    酵母膏聽聽聽聽聽聽聽聽1.0g聽  
    卫矛醇 聽  聽10.0g聽  
    氯化钠    5.0g聽  
    磷酸氢二钾  0.3g聽  
    溴麝香草酚篮 0.08g或8g/L溶液10mL聽  
    琼 脂聽聽聽聽聽聽聽聽2.5g聽  
    蒸馏水   聽聽1000.0mL聽  
    除溴麝香草酚蓝外,将其他成分加入蒸馏水中,搅拌均匀,静置约10聽min,加热煮沸至完全溶解,调至pH7.1±0.1,加入溴麝香草酚篮,呈绿色,分装试管(12mm×100mm),聽聽in,灭菌后立即取出,冷却备用。  
    试验与判断:
    穿刺接种待试菌,于37℃培养24±2h,阳性反应为黄色阴性不变色。  
    注:新制备的培养基均应用已知阳性及阴性菌进行测试,以保证培养基质量。每管约1~1.5mL,高压灭菌121℃,15m聽
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