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      常用培养基配方(二)



      录入时间:2010-7-2 15:18:28 来源:青岛海博论坛论坛

      丙二酸钠培养基
      成分:
        酵母浸膏 1g
        硫酸铵 2g
        磷酸氢二钾 0.6g
        磷酸二氢钾 0.4g
        氯化钠 2g
        丙二酸钠 3g
        0.2%溴麝香草酚蓝溶液 12ml
        蒸馏水 1000ml
        pH6.8
      制法:先将酵母浸膏和盐类溶解于水,校正pH后再加入指示剂,分装试管,121℃高压灭菌15min。
      试验方法:用新鲜的琼脂培养物接种,于36±1℃培养48h,观察结果。阳性者由绿色变为蓝色。
      葡葡糖铵培养基
      成分:
        氯化钠 5g
        硫酸镁(MgSO4鈥?H2O) 0.2g
        磷酸二氢铵 1g
        磷酸氢二钾 1g
        葡萄糖 2g
        琼脂 20g
        蒸馏水 1000ml
        0.2%溴麝香草酚蓝溶液 40ml
        pH6.8
      制法:先将盐类和糖溶解于水内,校正pH,再加琼脂,加热溶化,然后加入指示剂,混合均匀后分装试管,121℃高压灭菌15min,放成斜面。
      试验方法:用接种针轻轻触及培养物的表面,在盐水管内做成极稀的悬液,肉眼观察不见混浊,以每一接种环内含菌数在20~100之间为宜。将接种环灭菌后挑取菌液接种,同时再以同法接种普通斜面一支作为对照。于36±1℃培养24h。阳性者葡萄糖铵斜面上有正常大小的菌落生长;阴性者不生长,但在对照培养基上生长良好。如在葡萄糖铵斜面生长极微小的菌落可视为阴性结果。
      注:容器使用前应用清洁液浸泡。再用清水、蒸馏水冲洗干净,并用新棉花做成棉塞,干热灭菌后使用。如果操作时不注意,有杂质污染时,易造成假阳性的结果。
      Hugh-Leifson培养基(O/F试验用)
      成分:
        蛋白胨 2g
        氯化钠 5g
        磷酸氢二钾 0.3g
        琼脂 4g
        葡萄糖 10g
        0.2%溴麝香草酚蓝溶液 12ml
        蒸馏水 1000ml
        pH7.2
      制法:将蛋白胨和盐类加水溶解后,校正pH至7.2。加入葡萄糖、琼脂煮沸,溶化琼脂,然后加入指示剂。混匀后,分装试管,121℃高压灭菌15min,直立凝固备用。
      试验方法:从斜面上挑取小量培养物作穿刺接种,同时接种两支培养基,其中一支于接种后滴加溶化的1%琼脂液于表面,高度约1cm,于36±1℃培养。
      马尿酸钠培养基
      成分:
        马尿酸钠 1g
        肉浸液 100ml
      制法:将马尿酸钠溶解于肉浸液内,分装于小试管内,并于管壁画一横线。以标志管内液面高度,高压灭菌121℃20min。
      试剂:三氯化铁(FeCl3鈥?H2O)12g,溶于2%盐酸溶液100ml中即成。
      试验方法:用纯培养物接种,于42℃培养48h,观察培养液是否到达试管壁上记号处,如不足时,用蒸馏水补足至原量。经离心沉淀,吸取上清液0.8ml,加入三氯化铁试剂0.2ml,立即混合均匀,经10~15min,观察结果。
      结果:出现恒久之沉淀物为阳性。
      营养明胶
      成分:
        蛋白胨 5g
        牛肉膏 3g
        明胶 120g
        蒸馏水 1000ml
        pH6.8~7.0
      制法:加热溶解,校正至pH7.4~7.6,分装小管,121℃高压灭菌10min,取出后迅速冷却,使其凝固。复查最终pH应为6.8~7.0。
      试验方法:用琼脂培养物穿刺接种,放在22~25℃培养,每天观察结果,记录液化时间。或放在36士1℃培养,每天取出,放冰箱内30min后再观察结果。

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