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细菌生化试验——硝酸盐还原试验



录入时间:2008-9-12 9:34:32 来源:青岛海博论坛论坛

聽聽聽
聽聽聽原理:有的细菌能把硝酸盐还原为亚硝酸盐,而亚硝酸盐能和对氨基苯磺酸作用生成对重氮基苯磺酸,且对重氮基苯磺酸与α-萘胺作用能生成红色的化合物N-α-萘胺偶氮苯磺酸。
(一)适用于需氧菌的方法
培养基:
硝酸钾(不含NO2-)聽聽聽聽聽聽聽聽聽0.2g
蛋白胨聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽5g
蒸馏水聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽1000ml
溶解,调节pH至7.4,分装试管。每管约5毫升,15磅高压灭菌15分钟。
试剂:
甲液聽聽聽聽对位氨基苯磺酸聽聽聽聽聽聽聽聽聽0.8g
5N醋酸溶液聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽100ml

乙液聽聽聽聽α—萘胺聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽0.5g
5N醋酸溶液聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽100ml
方法:接种细菌后37℃培养4天,沿管壁加入甲液二滴与乙液二滴,当时观察。阳性者立刻呈红色。
(二)厌氧菌硝酸盐培养基法
培养基:
硝酸钾(不含NO2-,化学纯)聽聽聽聽1g
磷酸氢二钠聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽2g聽聽聽聽聽聽聽
葡萄糖聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽1g聽
琼脂聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽1g
蛋白胨聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽20g
蒸馏水聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽1000ml
加热溶解,调整pH至7.2,过滤,分装试管,15磅高压灭菌15分钟。
方法:接种后作厌氧培养,试验方法和结果观察同上法,但培养1~2日即可。

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