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    植物组织培养之污染与检测(四)



    录入时间:2011-8-31 17:07:48 来源:中国生命科学实验

    四、针对污染源常使用的防治方法

    A. 种类

    1. 热疗-对病毒较有效但须花费时间。处理时,需6-12星期在30-40℃。

    2. 冷疗法-亦对病毒有效。

    3. 利用抗生素。

    4. 以分生组织,不带病毒等污染源。

    5. 利用培养基中高糖,高盐的浓度。

    6. 利用抗并毒药物。

    7. 营养需求不同。

    8. 利用水。

    9. 抽样检测。

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    B. 防治方法之效果讨论

    1. 热疗法及冷疗法

    对病毒有效,但须花时间处理,例如:热疗法处理时间需花6-12星期在30-40℃。

    2. 利用抗生素

    这是目前较常用的方法,但是在抗生素加入培养基,其有效浓度常因植物具有半渗透功能,而使浓度无法达到有效浓度。使用抗生素时,需注意下列事项:

    (1)要知道抑制的微生物为何,再使用抗生素,及对症下药。

    (2)要决定最小抑制浓度,以降低成本。

    (3)要确定抗生素不会对植物造成并害或突变。

    (4)确定抗生素在培养基上是否有作用。

    (5)使用时,常因需要而多种混合或交替使用。

    (6)有些抗生素在某些国家是禁止使用,使用前必须做询问此药剂是否合法使用。

    使用抗生素的缺点

    (1)可能对哺乳类动物有害。

    (2)若是使用生长期较长的植物,微生物亦有抗药性产生。

    (3)容易错误使用:没有针对微生物而使用各种不同的抗生素。

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    抗生素的种类聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽对象

    聽聽

    抑制细胞壁合成

    Bactracin聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽G(+),杀菌,对抗β-lactams的菌有作用

    β-lactams聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽 G(+),杀菌,若用10-100倍,则对G(-)有效

    Glycopeptides聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽G(+),杀菌,但恨贵,不易有抗药性

    抑制膜的形成聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽

    plymixins聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽对G(-)Psedomonas spp.有效

    抑制蛋白质的合成

    Ghloramphrnical聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽杀菌作用,便宜,但对植物有毒害作用

    Aminoglycosides聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽使用对象广泛,对植物有毒害作用,在碱性环境下较有活性可针对G(-)可和盘尼西林(pencillins)一起作用

    Macrolides and聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽对G(+)有静菌作用

    Lincosamides

    Tetracyclines聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽 为静菌作用,对G(+)、G(-)都可以会刺激酵母菌,植物有害对

    核酸抑制物质

    Qutnolnes聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽 杀菌,对 G(+)有效,10-100倍浓度则对G(-)有效,有抗药性产生,可引起过敏反应易

    Rifampicin聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽杀菌,对一些G(+)或G(-)的细菌有作用,但常有抗药性产生

    Trimethoprim聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽 对于一些 G(+)或G(-)的细菌有作用,Trimethoprim

    Sulphonamides聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽Sulphonamides两种混合使用有加强的作用

    聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽Sulphonamides在碱性环境下较活跃

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    3. 分生组织法

    主要是针对在植物内部寄主的菌类,如病毒等。因其生长速度无法长到顶芽的分生组织,所以在顶芽的分生组织则无病原菌存在。可以利用此分生组织培养成植株即可避免感染问题。

    4. 利用培养基中高盐或高糖的浓度

    在培养基中有一些高盐或高糖的浓度可抑制微生物生长,或有单宁酸的存在时也可以达到抑制效果。

    5. 利用抗病毒药物

    Ribaririn-对于ssRNA病菌有抑制作用,但是价格昂贵。

    6. 营养需求不同

    因为不同的菌类其营养需求不同,因此可利用选择性培养基可筛选或抑制一些微生物。

    7. 利用水淹

    利用水将植株清洗或是完全浸没,以避免其上的接种源四处扩散。

    8. 抽样检测

    对于后代植株的抽样检测,可将污染严重的个体去除。以上这些方法可以综合使用,以建立一个清洁的植株。

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