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      细菌芽孢染色



      录入时间:2015-3-24 10:39:21 来源:青岛海博论坛论坛生物

      一、目的

      学习并掌握细菌芽孢染色的方法及原理。

      二、原理

      细菌的芽孢具有一层结构构致密的芽孢壁,通透性差、着色较难,用普通染色法染色菌体着色而芽孢呈现不染色的轮廓,但特殊处理(加热染色或腐蚀性药物处理)色素即可,透过芽孢壁使芽孢着色,一经着色便不易褪色,脱色时只能脱掉菌体的颜色而保留芽孢的颜色。因此,如再换另一种颜色的染液复染菌体,便会使菌体和芽孢呈不同颜色的鲜明对照。

      三、材料

      1.菌种 枯草芽孢杆菌。

      2.仪器及其他 显微镜,接种环、酒精灯、载玻片、7.6%的孔雀绿染色液、 0.5%的蕃红、石炭酸复红、美蓝、吸水纸、枯草芽孢杆菌、水浴锅或小烧杯与三角架。

      四、方法与步骤

      1.孔雀绿蕃红芽孢染色法

      (1)涂片经火焰固定,滴定孔雀绿染液于涂片上,加热至产生蒸汽达3~5min (加热时要慢慢来回移动,添加染液勿使涂片干燥)。

      (2)水洗后,再用蕃红染液复染1-2min。

      (3)水洗、干燥、镜检、绘图。芽孢被染上绿色,营养体呈红色。
      2.石炭酸复红染色法

      (1)试管一支.加蒸馏水3銆淈/span>4滴,取1銆淈/span>2环芽抱杆菌于水中,并充分摇荡制成均匀的悬浮液。

      (2)滴加等量3銆淈/span>4滴石炭酸复红液摇匀,水浴煮沸10min以上。

      (3)取上述加热后的染色菌悬液2銆淈/span>3环于载玻片上制成涂片,然后经过干燥、火焰固定、水洗。

      (4)美蓝复染3~4min,经水洗、干燥后,镜检,绘图。

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