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      WS琼脂原理及实验现象

      赵宇
      录入时间:2018-11-26 9:18:22 来源:青岛海博论坛论坛生物

      一、实验原理:

      用于沙门氏菌的选择性分离培养

      月示蛋白胨、牛肉膏提供碳源、氮源、维生素和矿物质;乳糖、蔗糖为可发酵的糖类;十二烷基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌;氯化钠维持均衡的渗透压;硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生,使菌落中心呈黑色;琼脂是培养基的凝固剂;溴麝香草酚兰和酸性复红为pH指示剂,发酵糖产酸的菌落呈橙黄色,不发酵糖的菌落为蓝绿色。

      二、培养基配方(g/L):

      月示蛋白胨

      12.0

      牛肉膏

      3.0

      氯化钠

      5.0

      乳糖

      12.0

      蔗糖

      12.0

      十二烷基硫酸钠

      2.0

      酸性复红

      0.1

      溴麝香草酚蓝

      0.064

      硫代硫酸钠

      6.8

      柠檬酸铁铵

      0.8

      琼脂

      12.0

      三、操作步骤

      使用前,把制备好的平板放置室温10-20分钟。

      1、制备质控菌液。

      2、目标菌选择合适稀释度的质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。

      3、非目标菌用1μL接种环取质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面划六条平行直线,同时接种两个平板。

      4、36±1℃倒置培养基培养18-24小时,记录实验结果。

      接种以下质控菌株,在36±1℃需氧培养18-24小时:

      控菌株

      菌株编号

      其他特征

      鼠伤寒沙门氏菌

      ATCC14028

      蓝绿色菌落有黑色中心

      肠炎沙门氏菌

      CMCC(B)50760

      蓝绿色菌落有黑色中心

      大肠埃希氏菌

      ATCC25922

      黄色菌落有胆盐沉淀环

      金黄色葡萄球菌

      ATCC6238

      抑制

      普通变形杆菌

      ATCC13355

      黄色菌落有黑色中心


      聽聽

      图1-2 聽WS琼脂微生物质控结果

      备注:a: 肠炎沙门氏菌,b:鼠伤寒沙门氏菌,c: 大肠埃希氏菌,d;普通变形杆菌,e金黄色葡萄球菌

      方法的局限性

      本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。


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      注:本文属海博论坛论坛生物原创,未经允许不得转载。

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