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硝酸盐还原(生化管)

所需试剂：
1、硝酸肉汤生化管：有GB033、SN047、GB182等多种配方，适用于不同细菌的硝酸盐还原试验，可根据具体需要选用。本视频以GB033为例介绍。
2、GB129硝酸盐（产气）：用于细菌的硝酸盐还原产气试验。
3、HB8282硝酸盐还原试剂盒：与硝酸盐肉汤配套使用，用于结果观察。
试验菌的接种：
1、GB033：打开安瓿瓶，接种试验菌，36±1℃培养18-24h。
2、GB129：使用前需将小倒管中气体排出，打开管盖，接种试验菌，36±1℃培养20-24h，注意专性需氧菌培养时不能将管盖拧紧。

结果判断及原理：
1、GB033：接种试验菌培养后的硝酸盐肉汤需滴加硝酸盐还原试剂来检验硝酸盐是否被利用生成亚硝酸盐。
①若试验菌利用硝酸盐生成亚硝酸盐，亚硝酸盐与试剂反应生成红色物质，则滴加试剂后呈红色（阳性）；
②若试验菌利用硝酸盐生成氨，则滴加试剂为无色，此时继续加入适量锌粉，仍不变红，证明培养物中无硝酸盐的存在（全部被利用），硝酸盐还原试验依然判为阳性；
③若试验菌不利用硝酸盐，则滴加试剂为无色，继续加入锌粉后溶液变红，证明硝酸盐未被利用，结果判定为阴性。
2、GB129：若试验菌利用硝酸盐生成氮气，则小倒管中囤积气体，判定为阳性；小倒管中无气体，则判定为阴性。

锌粉的作用：
锌粉可将硝酸盐还原为亚硝酸盐，亚硝酸盐继续与硝酸盐还原试剂发生红色反应因此可以用锌粉来检验培养基中是否还含有硝酸盐，从而帮助判断反应的阴阳性。

注意事项：
某些细菌利用硝酸盐缓慢可延长时间培养，结果为阳性依然可判定为硝酸盐还原阳性。